强心苷检识方法—颜色反应

　　强心苷的颜色反应很多，根据颜色反应发生在分子的不同部位可以分为以下数种：
　　1. 作用于甾体母核的反应
一般在无水条件下，经强酸（如硫酸、磷酸、高氯酸）、中等强度的酸（如三氯乙酸）或lewis酸（如三氯化锑、二氯化锌等）的作用，甾体化合物经脱水形成双键、双键移位，分子间缩合形成共轭双键系统，并在浓酸溶液中形成多烯阳碳离子的盐而呈现一系列的颜色变化。常见的反应有：
　　（1）乙酐浓硫酸反应（Liebermann-Burchard反应）：取试样溶于冰醋酸，加浓硫酸-醋酐（1∶20）混合液数滴，反应液呈黄→红→蓝→紫→绿等变化，最后褪色。
（2）Tschugaev反应：取试样溶于冰醋酸，加无水氯化锌及乙酰氯后煮沸，或取试样溶于氯仿或二氯甲烷，加冰醋酸、乙酰氯和氯化锌煮沸，反应液呈紫→红→蓝→绿等变化，B环有不饱和双键的作用更快。
（3）磷酸反应
（4）Salkowski反应：将试样溶于氯仿，沿试管壁加入浓硫酸，静置，氯仿层呈血红色或青色，硫酸层有绿色荧光。
（5）三氯乙酸氯胺T（chloramine T）反应：将试样醇溶液点在滤纸（或薄板）上，喷以三氯醋酸-氯胺T试剂（25%三氯醋酸乙醇溶液4 ml加3%氯胺T水溶液1ml混匀），待纸片干后，100℃加热数分钟，于紫外光下观察。该反应可初步区别洋地黄类的苷元。
（6）三氯化锑反应
2. 作用于α、β不饱和内酯环的反应
甲型强心苷在碱性醇溶液中，双键由20（22）转移到20（21），生成C22活性亚甲基，能与下列活性亚甲基试剂作用而显色，乙型强心苷不能产生活性亚甲基，故无此类反应。具体的有：
　　（1）亚硝酰铁氰化钠试剂（Legal反应）
（2）间二硝基苯试剂（Raymond反应）：反应机理是间二硝基苯与活性亚甲基缩合后，又经过量间二硝基苯氧化成醌式而显色。此法可用于薄层色谱和纸色谱显色，喷雾后显紫红色，5~10分钟褪色。
（3）3，5-二硝基苯甲酸试剂（Kedde反应）：原理与间二硝基苯试剂反应类似，本试剂可作为强心苷纸色谱和薄层色谱的显色试剂，喷雾后显紫红色，几分钟后褪色。
（4）碱性苦味酸试剂（Baljet反应）：《药典》以此法测定强心苷类药物含量。
以上反应均呈红或紫红、橙红色。
3. 作用于α-去氧糖的反应
（1）Keller-Kiliani（K-K）反应：该反应为α-去氧糖的特征性反应，对游离的α-去氧糖或在此条件下能水解产生游离α-去氧糖的苷都能反应。
（2） 吨氢醇反应
（3）过碘酸-对硝基苯胺反应：该反应原理是：过碘酸将α-去氧糖氧化成丙二醛，丙二醛与硝基苯胺试剂反应呈深黄色。
（4）对-硝基苯肼反应
（5）对-二甲氨基苯甲醛反应：分子中含有α-去氧糖的强心苷可显灰红色斑点。